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                  SB色譜柱分離過程的核心
                  點擊次數:2950 發布時間:2016-01-25
                     SB色譜柱是分離過程的核心,一支穩定,的色譜柱對建立普適性強,重現性好的方法是*的.不同供應商的色譜柱,甚至來源相同,認為完全一樣的色譜柱之間,可能也會存在很大差異,尤其是不同的色譜柱在塔板數,譜峰的對稱性,保留值,峰間距以及使用壽命方面會有所不同,而這些不同對建立理想的HPLC方法會產生很大影響.本章中,我們將提供一些有關色譜柱擔體,固定相及柱填料的信息供讀者參考;討論SB色譜柱應用中的問題,以及適宜的解決方案,以確保方法普適性強,重現性好,同時也討論了在常規分析中,為獲得*結果,一支"好"色譜柱的重要意義.
                    選擇SB色譜柱時,大多數使用者都認為柱間的重現性是方法建立中極為重要的因素.色譜工作者不愿在校準了一具體系統后,又不得不為一新色譜柱再重新建立HPLC方法.一些生產廠能在一定程度上保證柱性能指標的重現性,如色譜柱塔板數(N),特定樣品與條件下的選擇性,反壓(壓力降),特定測試溶質的保留值(k).因此,對許多使用者來說,生產產品的廠家的信譽很重要.SB色譜柱價格對一些用戶是重要的因素,但上述討論的其它因素在建立一個普適性強,令人滿意的方法時往往更加重要.色譜柱價格在建立和應用普適性強,可靠的HPLC方法的整個費用中,僅占一小部分。
                    通過改變SB色譜柱硅膠基質的官能團,可以變其反相分離的選擇性.以其它官能團改性的多孔聚合微粒,如C18,NH2和CN,也可改變固定相的選擇性.不過,目前用于聚合物色譜柱的功能團僅有幾種.SB色譜柱與硅膠微粒相比,其缺點是柱效低,極易碎裂.用一些流動相/溶質系統,尤其是大k值的組分,不易獲得好峰形.雜質往往會聚集于柱床上,zui終以背景干擾流出.因此,石墨碳柱要求用高純流動相,被吸附的雜質會不可逆地改變色譜柱的性能,所以樣品清除布置對延長色譜柱壽命很有用.這種材料的色譜柱僅有短柱,而且比較貴.目前可供選擇的孔徑還不多.
                    大多數用于SB色譜柱是用一節內壁經高度拋光處理的直不銹鋼管,用收縮接頭將其與HPLC儀器連接.不銹鋼可用于所有有機溶劑與大多數水性緩沖液.然而,含氯的流動相會緩慢地"鹵素腐蝕"不銹鋼材質(尤其在低p H時),所以使用該流動相時應倍加小心.綜合考慮的話,大多數HPLC用不銹鋼色譜柱.也有用玻璃,玻璃襯里不銹鋼與塑料制作的商品柱,SB色譜柱用于可能與不銹鋼發生有害作用的特殊樣品.然而,資料中能證明不銹鋼柱發生這類問題的很少.這些與不銹鋼成分(鐵,鉻,鎳)牢固絡合的樣品zui有可能產生這類問題.色譜柱內壁的表面積很小,所以發生不良反應的機會不大.
                    多孔燒結物(濾片)封閉色譜柱的兩頭,固定住填料微粒.一般來說,5μm與3μm的微粒分別用2μm與0.5μm孔徑的不銹鋼濾片.不銹鋼柱發生的問題,通常要追溯到入口不銹鋼濾片,SB色譜柱的表面積比可能與樣品發生不良反應的色譜柱內壁要大得多.峰形不好與樣品回收率低,可能預示濾片出現問題.多孔鈦與聚合物濾片的活性弱,可用于對付這類偶爾發生的問題.
                   
                  021-62176111
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