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                  HILIC色譜柱護柱有方使用更長久
                  點擊次數:3308 發布時間:2015-07-24
                    HILIC色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20?m(5~10?m),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。HILIC色譜柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70 kg/cm2 時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經過拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。
                    HILIC色譜柱的離子源、質量分析器和檢測器必須在高真空狀態下工作,以減少本底的干擾,避免發生不必要的離子-分子反應。所以質譜反應屬于單分子分解反應。利用這個特點,我們用液質聯用的軟電離方式可以得到化合物的準分子離子,從而得到分子量。HILIC色譜柱由機械真空泵(前極低真空泵),擴散泵或分子泵(高真空泵)組成真空機組,抽取離子源和分析器部分的真空。只有在足夠高的真空下,離子才能從離子源到達接收器,真空度不夠則靈敏度低。
                    HILIC色譜柱是操縱物資的沸點、極性及吸附性子的差別來完成夾雜物的分手,其進程如圖氣相闡發流程圖所示。待闡發樣品在汽化室汽化后被惰性氣體(即載氣,也叫活動相)帶入HILIC色譜柱,柱內含有液體或固體活動相,因為樣品中各組分的沸點、極性或吸附機能分歧,每種組分都偏向于在活動相和牢固相之間構成分派或吸附均衡。但因為載氣是活動的,這類均衡實際上很難創建起來。也恰是因為載氣的活動,使樣品組分在活動中進行反復屢次的分派或吸附/解吸附,HILIC色譜柱結果是在載氣中濃度大的組分先流超卓譜柱,而在牢固相平分配濃度大的組分后流出。當組分流超卓譜柱后,當即進入檢測器。檢測器能夠將樣品組分的與否變化為電旌旗燈號,而電旌旗燈號的巨細與被測組分的量或濃度成反比。當將這些旌旗燈號放大并記實上去時,便是氣相色譜圖了。
                    HILIC色譜柱使用過程中的護柱方法很簡單,用預柱。(但要注意,若有時出峰異常,要先看看是不是它有問題了)每次做完分析,都要進行沖洗,分析用流動相中若無酸、堿、鹽類物質,建議用90%甲醇沖洗30~60min;若分析用流動相中含以上物質,要先用10%甲醇(或用與分析用流動相同比例,把含酸、堿、鹽溶液換成水)沖洗1小時左右,再C梯度走到90%甲醇沖洗30~60min(若用多元泵)。有必要時再循環幾次,可以適當縮短時間。若長時間不用該HILIC色譜柱,要沖洗好后,用純甲醇或乙腈封存。若流動相中用到離子對試劑,更應該好好沖洗,且該色譜柱作為,不能再做其它物質分析用。因HILIC色譜柱填料性質已與原來所不同,在該柱上所摸索的色譜條件,可能在其它同類柱子上得不到重現。盡量避免反沖,除非該色譜柱廠家明確說明允許。普通C18柱盡量避免在40℃以上的溫度下分析定期測柱效,有下降,可以用10%異丙醇甲醇沖洗色譜柱。若柱效還沒有改善,可以再生,甲醇-二氯甲烷-甲醇。
                    HILIC色譜柱在色譜法中存在兩相,一相是牢固不動的,咱們把它叫做牢固相;另外一相則不竭流過牢固相,咱們把它叫做活動相。色譜法的分手原理便是操縱待分手的各類物資在兩相中的分派系數、吸附本領等親和本領的分歧來進行分手的。使用外力使含有樣品的活動相(氣體、液體)經由過程一牢固于柱中或平板上、與活動互相不相溶的牢固相概況。HILIC色譜柱當活動相中照顧的夾雜物流經牢固相時,夾雜物中的各組分與牢固相產生互相感化。因為夾雜物中各組分在性子和布局上的差別,與牢固相之間發生的感化力的巨細、強弱分歧,跟著活動相的挪動,夾雜物在兩相間顛末反復屢次的分派均衡,使得各組分被牢固相保存的時間分歧,從而按必定次序由牢固相中前后流出。HILIC色譜柱與得當的柱后檢測法子連系,完成夾雜物中各組分的分手與檢測。
                   
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